分光光度分析法是最常用的定量分析方法之一。其主要特点是:
(1)应用范围广泛。很多物质在紫外-可见光区有吸收,因此可借助于比色法进行测定;
(2)适用的浓度范围广泛。从常量分析到痕量分析(经预富集后)均可实现;
(3)灵敏度高、选择性好、精确度高、分析成本低、操作简便、快速。
因此广泛应用于地质、冶金、化工、医学、食品、制药及环境监测等行业。在分光光度法中,比色池的选择、清洗和使用对分析结果有着重要的影响。
比色池的使用
在使用比色池时,两个透光面要完全平行并垂直置于比色池架中,以保证在测量时入射光垂直于透光面,避免光的反射损失,保证光程固定。
使用时应注意以下几点:
1、拿取比色池时,只能用手指接触两侧的毛玻璃,避免接触光学面。同时注意轻拿轻放防止外力对比色池的影响而导致产生应力后破损;
2、使用比色池时应于测试前将待测液倒入比色池洗涤三次(注意不要产生气泡);
3、凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液,不得长期盛放在比色池中;
4、不能将比色池放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱内烘烤;
5、当发现比色池里面被污染后,应用无水乙醇清洗并及时擦拭干净;
6、不得将比色池的透光面与硬物或脏物接触。盛装溶液时,高度为比色池的2/3处即可,光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附,然后再用镜头纸或丝绸擦拭;
7、比色池中的液体应沿毛面倾斜慢慢倒掉,不要将比色池翻转直接口向下倒出。放在干净的滤纸上吸干剩余液,然后用蒸馏水冲洗比色池内部,倒掉操作同上;
8、若有液体外溢要用好点的试纸擦拭,最好是沿一个方向,不要来回的擦拭;
9、在使用时,每次装入参比液或样品液测量后,会将参比液或样品液倒入废液瓶。倒出时人们的习惯做法是很随意地倒出参比液或样品液,这样参比液或样品液会流到比色池的光面上,再次装入参比液或样品液后我们会用滤纸或脱脂棉擦拭比色池的光面,这样时间久了就会在比色池的光面上留下划痕,划痕会影响测定值,就必须更换新的比色池。好的方法是,两手捏住比色池后将参比液或样品液沿着比色池的一个角倒入废液瓶,这时不要着急将比色池离开废液瓶,而是顺势将比色池的倒出角贴到废液瓶上,让比色池里面的液体全部沿着这个角流出。这样,比色池的光面上几乎不会粘有液体,也就不用再去用滤纸或脱脂棉擦拭,减少擦拭次数,这样就会延长比色池的使用时间。
比色池的清洗
分光光度法中比色池洁净与否是影响测定准确度的因素之一。因此,必须重视选择正确的洗净方法。
每次使用完毕的比色池,一般先用自来水冲洗,再用蒸馏水冲洗三次,倒置于干净的滤纸上晾干,然后存放于比色池盒中。
如果比色池被有机物污染,宜用盐酸-乙醇(1+2)混合液浸洗,也可用相应的有机溶剂浸泡洗涤。如:油脂污染可用石油醚浸洗;铬天青显色剂污染可用硝酸(1+2)浸洗等。
比色池不可用碱液洗涤,也不能用硬布、毛刷刷洗。含有能腐蚀玻璃物质的溶液,如氢氟酸、氟化物的高浓度溶液不可放入比色池中。含氟离子浓度低的溶液也不宜在池中久置。
比色池质地较脆,石英池尤甚,使用、清洗时动作要轻、切勿摔碰。石英比色池清洁方法如下:1、用乙醚和无水乙醇的混合液(各50%)清洗;2.若太脏可用专用洗液清洗。但时间要短于10分钟,再用清水清洗干净;3、不要用洗洁精之类的清洁剂以免影响测量。
注:高级分光光度计都采用专利技术加工的石英比色池,采用石英本体材料经过高温熔融,减少污染,使用寿命更长。随着光谱分析仪器的迅速发展,微量、半微量、荧光等一些比色池不断出现,对使用维护、清洗比色池有更高的要求。一般在国外都是一次性使用,在国内为了节约成本,开源节流而重复使用。 |